Design and development of an analytical method using HPLC for the determination of the chemical marker present in Tropaeolum tuberosum

Abstract

A pesar de la indudable creencia ancestral de que numerosas plantas herbales tienen poderes curativos, la complejidad química de las mismas ha dificultado el desarrollo de estudios científicos que avalen su actividad terapéutica. En los últimos años, la industria farmacéutica, a través de modernas técnicas de caracterización, se ha centrado en desarrollar métodos que permitan estudiar con más detalle estas plantas, con el fin de lanzar al mercado productos de alta calidad. La inexistencia de un método analítico centrado en el control de calidad del polvo de Tropaeolum tuberosum (mashua) como materia prima ha desarrollado el interés de la industria farmacéutica Ecuatoriana para investigar esta planta medicinal endémica de los Andes. De esta forma, mashua fue la planta medicinal objeto de estudio en este proyecto, que fue seleccionada por su reconocida actividad antiinflamatoria en la medicina popular. Esta investigación se centra en determinar un marcador químico presente en mashua, que será utilizado como patrón de referencia en el control de calidad de la materia prima (polvo de mashua). El marcador químico se obtendrá mediante el diseño y desarrollo de un método analítico basado en Cromatografía Líquida de Alta Resolución en Fase Reversa con detección UV-Vis (RP-HPLC-UV/Vis). La separación de estos compuestos en el equipo se logró utilizando tanto la columna THERMO L1 (C18) (150 mm x 4.6 mm y 5 um) como un sistema de elución en gradiente. La fase móvil consta de una solución tampón pH 2.5 con agua (TEA 0.01 M, H3PO4) como Solvente A, Metanol como Solvente B y Acetonitrilo como Solvente C durante 25 minutos. El método de HPLC desarrollado en este trabajo demostró que a (+)-catequina y quercetina no son marcadores químicos apropiados para la caracterización y control de calidad de mashua porque estos dos compuestos no existen o existen en una cantidad residual en el extracto hecho a partir del polvo de esta planta medicinal andina. Así, es necesario adquirir otros estándares descritos en la literatura científica para mashua y disponibles en el mercado de forma a encontrar marcadores químicos apropiados para caracterizar y hacer en control de calidad de esta planta. Esta metodología es de extrema importancia para la industria farmacéutica ecuatoriana porque no existe actualmente ningún método de control de calidad para mashua, lo que impide su comercialización en el mercado nacional y internacional.