Chemical synthesis and characterization of monothiadiazine, and its evaluation of the humoral response in BALB/c mice

Abstract

La resistencia a la cloroquina como un tratamiento efectivo a la malaria muestra un severo problema sanitario. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue sintetizar tres derivados de mono tiadiazina (mono-THTT) donde la valina (Val) está siempre presente como sustituyente en N-3 o N-5: Val-Val, Leu-Val, and Val-Gly. Todos los mono-THTT fueron caracterizados usando espectroscopía infrarroja (FT-IR), punto de fusión (MP) y cromatografía líquida de ultra alta resolución (UHPLC). La respuesta humoral inmune de los mono-THTT fue evaluado en modelos de ratón BALB/c, usando suero hiperinmune en un ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA) indirecto. Así también, fueron evaluadas la reactividad cruzada usando ELISA indirecta y la citotoxicidad de los compuestos usando un ensayo colorimétrico MTT de la compañía Promega. El compuesto Val-Gly fue reconocido por los anticuerpos monoclonales de todos los sueros hiperinmunes que fueron obtenidos de ratones BALB/c previamente inmunizados. Esto demostró que el compuesto más antigénico es Val-Gly, porque existen diferencias significativas entre la media del suero hiperinmune de Val-Gly contra el suero preinmune al ser evaluado junto a todos los compuestos mono derivados de la tiadiazina (mono-THTT). Sin embargo, el suero hiperinmune de los compuestos Leu-Val y Val-Val no difieren significativamente del suero preinmune en los ensayos de reactividad cruzada, indicando así que estos dos compuestos son débilmente antigénicos. Adicionalmente, debido a que los compuestos mono-THTT fueron reconocidos por sus propios anticuerpos, es viable su mezcla como terapia combinada. Finalmente, los ensayos de citotoxicidad demostraron que ningún compuesto mono-THTT es citotóxico.