Construction and use of reporter genes to visualize protein and amino acid utilization in Candida albicans

Abstract

Cándida albicans es un patógeno fúngico humano oportunista que generalmente vive como un comensal asociado con muchos nichos de huéspedes. C. albicans puede crecer como células de levadura unicelulares o como filamentos multicelulares llamados hifas. La virulencia requiere la capacidad de transición entre ambas morfologías. Este cambio puede desencadenarse por múltiples señales ambientales, como una temperatura de 37 grados y la presencia de ciertas fuentes de nitrógeno. El complejo sensor SPS es un conjunto de tres proteínas ancladas en la membrana plasmática que permite a C. albicans detectar y responder a los cambios en la disponibilidad de nitrógeno en los nichos del huésped, es decir detecta si los aminoácidos están libres o se encuentran en forma de proteínas y con respecto a eso, activa una ruta metabólica u otra. En este proyecto, haré uso de herramientas genéticas moleculares para generar indicadores fluorescentes asociados con la degradación de proteínas extracelulares y la absorción de aminoácidos. Esto permitirá la visualización de la utilización de nitrógeno por C. albicans in situ utilizando microscopía de fluorescencia y una variedad de nuevos medios y sustratos. Los resultados de este proyecto ayudarán a comprender mejor cómo C. albicans interactúa y responde a los factores ambientales presentes en los nichos de hospedadores humanos, además de servir como herramienta para generar un modelo in vitro de infección por candidiasis vulvovaginal.