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Title: Cytotoxicity of chlorpyrifos on SH-SY5Y human neuroblastoma cell line
Authors: Ramírez Cando, Lenin Javier
Ballaz García, Santiago Jesús
Rodríguez Cazar, Lizeth Geomara
Keywords: Clorpirifos
Células SH-SY5Y
Citotoxicidad
Chlorpyrifos
SH-SY5Y cells
Cytotoxicity
Issue Date: Dec-2023
Publisher: Universidad de Investigación de Tecnología Experimental Yachay
Abstract: El clorpirifos es un inhibidor de la acetilcolinesterasa, que provoca la acumulación de acetilcolina en la sinapsis. Es un insecticida ampliamente utilizado en todo el mundo y reconocido como una neurotoxina humana moderada. En 2020, este insecticida fue prohibido en toda la UE, pero todavía se usa en Ecuador. Por ello, este trabajo estudia la toxicidad aguda de CPF en células humanas SH-SY5Y indiferenciadas para evaluar el impacto de los pesticidas y el mecanismo de muerte celular neuronal inducida mediante estudios de detección de estrés oxidativo, ensayo de MTT y prueba de azul tripán. Las células contadas fueron procesadas y se obtuvo un diagrama de barras para analizar los datos del azul tripán. Los datos del ensayo MTT se analizaron mediante la curva dosis-respuesta. Los datos obtenidos de los experimentos de detección de ROS se analizaron mediante BoxPlots. Finalmente, se realizó un análisis de correlación entre los experimentos. Los resultados del ensayo MTT sugirieron que el efecto citotóxico del CPF en las células SH-SY5Y fue estadísticamente significativo (valor de p < 0,02), como lo indica una disminución de la viabilidad celular dependiente de la dosis y el tiempo. Estos son consistentes con los resultados de la prueba de azul tripán, que indica que el CPF reduce la actividad metabólica y la viabilidad de las células SH-SY5Y. La concentración más alta de CPF (10 µM) provocó más del 50 % de muerte celular. La detección de estrés oxidativo confirmó que la exposición al CPF aumenta la producción de ROS en las células SH-SY5Y, lo que podría provocar daño oxidativo y disfunción neuronal. En conclusión, estos resultados sugieren que CPF tiene un efecto neurotóxico sobre las células SH-SY5Y, lo que podría tener implicaciones para el desarrollo de enfermedades neurodegenerativas.
Description: Chlorpyrifos is an acetylcholinesterase inhibitor, which results in acetylcholine accumulation in the synapse. It is an insecticide widely used worldwide and recognized as a moderate human neurotoxin. In 2020, this insecticide was banned throughout the EU but is still commonly used in Ecuador. For that, this work studies the acute toxicity of CPF on human undifferentiated SH-SY5Y cells to assess the impact of pesticides and the mechanism of induced neuronal cell death through studies of oxidative stress detection, MTT assay, and Trypan Blue Test. The counted cells were processed, and a Bar Plot was obtained to analyze the trypan blue data. The data of the MTT assay were analyzed through the dose-response curve. The data obtained from the ROS detection experiments were analyzed through BoxPlots. Finally, a correlation analysis between the experiments was performed. The results of the MTT assay suggested that the cytotoxic effect of CPF on SH-SY5Y cells was statistically significant (p-value < 0.02), as indicated by a dose- and time-dependent decrease in cell viability. These are consistent with the results of the Trypan blue test, indicating that CPF reduces the metabolic activity and viability of SH-SY5Y cells. The highest concentration of CPF (10 µM) caused more than 50 % of cell death. Oxidative stress detection confirmed that CPF exposure increases ROS production in SH-SY5Y cells, which could lead to oxidative damage and neuronal dysfunction. In conclusion, these results suggest that CPF has a neurotoxic effect on SH-SY5Y cells, which could have implications for the development of neurodegenerative diseases.
URI: http://repositorio.yachaytech.edu.ec/handle/123456789/697
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