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Title: AFM settings of SH-SY5Y morphology assessment for in vitro toxicological testing
Authors: Ramírez Cando, Lenin Javier
Reinoso Jerez, Carlos Alberto
Ordóñez Sánchez, Ronny Alexander
Keywords: Mancozeb
Biomecánica celular
Toxicidad celular
Cellular biomechanics
Neurotoxicity
Issue Date: May-2024
Publisher: Universidad de Investigación de Tecnología Experimental Yachay
Abstract: El mancozeb, un fungicida ditiocarbamato usado extensamente en agricultura, ha generado preocupación por sus posibles efectos en la salud humana y ambiental. El presente estudio investiga los efectos biomecánicos del mancozeb en células neuronales humanas SH-SY5Y, empleando concentraciones de 0.5, 1.0 y 2.5 µM durante 24 y 48 horas. Utilizando la microscopía de fuerza atómica (AFM), una técnica que permite la evaluación detallada de propiedades mecánicas a nivel nanométrico, se analizaron cambios en el módulo de elasticidad, rigidez en retracción, energía y fuerza de adhesión, deformación, energía de disipación y altura Z. Los resultados revelaron que la exposición al mancozeb modifica significativamente las propiedades biomecánicas de las células. A las 24 horas, se encontró una correlación negativa entre la viabilidad celular y la rigidez en retracción (-0.9796227), indicando un aumento en la rigidez asociado con menor viabilidad celular. A las 48 horas, esta tendencia se invierte, mostrando correlaciones positivas con la viabilidad celular, especialmente en la fuerza de adhesión (0.8152651) y la rigidez en retracción. Estos hallazgos sugieren una adaptación celular al estrés inducido por el mancozeb. El estudio proporciona una comprensión del impacto del mancozeb en la biomecánica celular, resaltando la importancia de considerar la variabilidad temporal y la dosis en la respuesta celular a agentes tóxicos. Estos resultados aportan información al campo de la toxicología celular y pueden orientar estrategias para mitigar los efectos adversos del mancozeb.
Description: Mancozeb, a dithiocarbamate fungicide widely used in agriculture, has raised concerns about its potential impacts on human health and the environment. This present study investigates the biomechanical effects of mancozeb on human neuronal SH-SY5Y cells, using concentrations of 0.5, 1.0, and 2.5 µM over 24 and 48 hours. Utilizing Atomic Force Microscopy (AFM), a technique for a detailed evaluation of mechanical properties at the nanometric level, changes in Young modulus, retraction stiffness, adhesion energy and force, deformation, dissipation energy, and Z height were analyzed. Results indicated significant alterations in the biomechanical properties of cells exposed to mancozeb. At 24 hours, a negative correlation was observed between cell viability and retraction stiffness (- 0.9796227), suggesting increased stiffness associated with reduced cell viability. However, at 48 hours, this trend reversed, showing positive correlations with cell viability, particularly in adhesion force (0.8152651) and retraction stiffness. These findings suggest a cellular adaptation to stress induced by mancozeb. The study provides an understanding of the impact of mancozeb on cellular biomechanics, highlighting the importance of considering temporal and dose variability in the cellular response to toxic agents. These results provide information to the field of cellular toxicology and may guide strategies to mitigate the adverse effects of mancozeb.
URI: http://repositorio.yachaytech.edu.ec/handle/123456789/762
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