Estudio de la expresión del gen STR3 de Saccharomyces cerevisiae en presencia de pesticidas comúnmente usados en Ecuador

Abstract

La industria agrícola moderna enfrenta un dilema importante, pues la población mundial aumenta drásticamente y con ello se intensifica el uso de pesticidas para mantener la producción. Los fungicidas han demostrado relativa eficacia para controlar determinadas plagas y enfermedades en los cultivos, pero debido a su baja especificidad también han sido relacionados con afectaciones en diversos ecosistemas, destacando la necesidad del desarrollo de nuevas herramientas de monitoreo. El presente proyecto tiene como objetivo el desarrollo inicial de un biosensor basado en la modificación de Saccharomyces cerevisiae para la detección y cuantificación de pirimetanil, fungicida de uso común en la agricultura ecuatoriana. Con este fin, se clonó el promotor del gen STR3 fusionado al gen reportero GFP y se expresó en cepas de S. cerevisiae en presencia del pesticida pirimetanil. Los resultados muestran que las concentraciones mas altas del fungicida afectan significativamente el crecimiento de la levadura, destacando un efecto nocivo. Los análisis de fluorescencia revelaron que el sistema de expresión GFP respondió al estrés inducido, relacionando la intensidad de fluorescencia a las concentraciones mas altas (20 y 110mg/L) y siendo diferenciada de los controles negativos en cada tratamiento experimental. El intervalo de tiempo de 4 horas fue el más sensible registrando la intensidad mas alta. La respuesta celular de fluorescencia sugiere que el promotor STR3 es relevante para la construcción del biosensor propuesto, reiterando su potencial como herramienta para la detección y monitoreo del pirimetanil y otros pesticidas.