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Title: Characterization of the neurodevelopmental toxicity of the neonicotinoid insecticides Imidacloprid and Acetamiprid in human neuroblastoma SH-SY5Y cells
Authors: Ballaz García, Santiago Jesús
Campoverde Chicaiza, Damián Estuardo
Keywords: Neonicotinoides
β-catenina
β-actina
Western blot
Issue Date: Jan-2025
Publisher: Universidad de Investigación de Tecnología Experimental Yachay
Abstract: Ecuador es un territorio ampliamente agrícola, en una región caracterizada por explotación y una pobre regularización, resultando en un descuidado contacto de la población con agro-químicos. Entre ellos tenemos pesticidas sistémicos neonicotinoides (NNs) caracterizados por su acción y alta especificidad sobre los receptores de acetilcolina de tipo nicotínico (nAChR´s) de insectos. Aunque han sido declarados prácticamente inocuos para humanos, impera ca-racterizar los efectos de estos pesticidas sobre el sistema nervioso sabiendo la importancia de los nAChR´s en el desarrollo de funciones cognitivas, y la liberación de neurotransmisores, además considerando las funciones y mecanismos aún desconocidos. Tres días después de iniciado el proceso de diferenciación de la línea celular de neuroblastoma humano SH-SY5Y y usando el método western blot para identificar alteraciones en la estructura o nivel de expre-sión de β-actina, y β-catenina se busca evaluar el efecto a diferentes concentraciones de Imi-dacloprid y Acetamiprid. Realizando cuatro muestras, se aplicó la prueba de Kruskal Wallis y su respectivo análisis post hoc, prueba de Dunn, para determinar si existía diferencia en la expresión de la proteína como efecto de la dosis aplicada. Se obtuvo para Imidacloprid(p <.05) que a partir del tratamiento de 0.05 mM existe diferencia estadísticamente significativa, habiendo expresado entre el 50- 73 % de β-actina respecto con el control. En cambio, para Acetamiprid (p <.05), no se pudo comprobar diferencia estadísticamente significativa de la expresión de β-actina entre los tratamientos. Para la β-catenina se realizó un western blot donde se captó dos bandas para el tratamiento con Acetamiprid evidenciando efectos de los neonicotinoides.
Description: Ecuador is a predominantly agricultural territory characterized by exploitation and poor regula-rization, resulting in neglected contact with agrochemicals by the population. Among them are systemic Neonicotinoids Insecticide (NNIs) characterized by their action and high specificity on insects’ Nicotinic Acetylcholine Receptors (nAChR). Although they have been declared practi-cally harmless for humans, it is imperative to characterize the effects of these pesticides on the nervous system, knowing the importance of nAChRs in the development of cognitive fun-ctions and the release of neurotransmitters, in addition to considering the functions and me-chanisms still unknown. Three days after initiating the differentiation process of the human neuroblastoma cell line SH-SY5Y and using the western blot method to identify alterations in the structure or expression level of β-actin and β-catenin, we seek to evaluate the effect at different concentrations of Imidacloprid and Acetamiprid. The Kruskal Wallis test and its res-pective post hoc analysis, Dunn’s test, were applied to determine if there was a difference in the protein expression as an effect of the applied dose. It was obtained for Imidacloprid (p<.05) that from the 0.05 mM treatment, there is a statistically significant difference, having expressed between 50- 73 % of β-actin to the control. On the other hand, for Acetamiprid (p<.05), no statistically significant difference in β-actin expression between treatments was found. For β-catenin, a western blot was performed where two bands were detected for the Acetamiprid treatment, showing the effects of neonicotinoids.
URI: http://repositorio.yachaytech.edu.ec/handle/123456789/915
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